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细胞常规培养传代流程
细胞常规培养传代流程细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加1ml0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,建议边观察边消化)2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml*培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待...
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直接 ELISA法
直接ELISA法[直接ELISA法]实验步骤1.包被抗原1)用PBS或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度20μg/ml。用移液器吸取50μl稀释抗原到PVC酶标板上,按要求往后进行系列稀释。2)酶标板上覆盖封口膜,室温孵育2小时,或者4°C一夜。孵育时间需要优化。3)倒掉孵育溶液,用PBS洗板2次,每孔200μl。在水池上轻甩倒掉洗液,在纸巾上轻拍酶标板除去残留液[ELISA抗原缓冲液抗体]实验步骤1.包被抗原1)用PBS或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度20...
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间接 ELISA法
间接ELISA法间接ELISA法]实验试剂碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液(100mM)PBS封闭液洗涤液抗体稀释缓冲液实验步骤1.包被抗原1)用PBS或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度20μg/ml。吸取50μl稀释抗原到PVC酶标板上的*排孔,按要求往后进行系列稀释。2)酶标板上覆盖封口膜,室温孵育2小时,或者4°C夜。孵育时间需要优化。3)倒掉包被液,用PBS洗[ELISA间接缓冲液抗原包被]实验步骤1.包被抗原1)用PBS或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度20μ...
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磁珠法提取核酸的3种样本处理方法
磁珠法提取核酸的3种样本处理方法以生物磁珠为载体提取核酸,所有反应是在液体体系中进行的,但生物样本多种多样,有液体也有固体,或者固液混合体,大多数生物样本在进行核酸提取纯化之前需要进行一定的前处理,液化、富集、除杂等都是常见的前处理方式。一、液化将固体样本转化为液体样本是zui重要的样本前处理方法,固体样本是很难直接在试剂盒的作用下用于提取核酸的。固体样本跟杂质一样,会严重阻碍磁珠吸附核酸,并且耗损大量的磁珠位点,很难取得良好的提取效果。常见的固体样本如植物组织、动物组织、泥...
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ELISA样本制备及注意事项
ELISA样本制备及注意事项ELISA样本制备及注意事项一、血清的采集、处理和保存1、真空采血针采集新鲜血液,加入无菌试管中;2、采血后室温静置1小时;3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min;4、取上清。分装冻存备用:2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-80℃下,可放置保存6个月;5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解...
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改造T细胞来靶向肿瘤细胞,精细调控基因开关
改造T细胞来靶向肿瘤细胞,精细调控基因开关zui近,细胞疗法的专家、加州大学旧金山分校(UCSF)教授、霍华德?休斯医学研究所的研究员,兼初创公司CellDesignLabs的科研创始人WendellLim博士推出了一项有关T细胞免疫疗法的崭新技术。这一成果发表于近期的《Cell》期刊上,报导了一种使用synNotch受体技术,精细调控基因开启或关闭,特异性启动T细胞免疫反应来靶向肿瘤细胞。▲WendellLim博士(图片来源:UCSF)通过长期进化过程,人类的免疫细胞可有效...
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天津医科大学发现肿瘤招募干细胞促进肿瘤生长和进展的新机制
天津医科大学发现肿瘤招募干细胞促进肿瘤生长和进展的新机制zui近一项新研究发现了肿瘤从骨招募干细胞将其转变为癌相关成纤维细胞进而促进肿瘤进展的新机制。这项工作准确地找到了参与上述过程的生化途径和细胞信号分子,或为抑制肿瘤生长提供新的治疗靶点。相关研究结果发表在学术期刊StemCellsandDevelopment上。这项研究由天津医科大学的XueYang和Xiong-ZhiWu等人完成,他们在题为“bFGFPromotesMigrationandInducesCancer-a...
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防治帕金森病的关键可能在肠道
防治帕金森病的关键可能在肠道一项研究表明,肠道可能在预防帕金森病发生方面起到重要作用,原因可能在于小肠免疫细胞对线粒体的"监控"。爱荷华大学的研究人员发现肠道可能是预防帕金森病的关键,位于小肠的免疫细胞启动免疫应答能够保护神经元对抗与帕金森病有关的损伤。"我们认为肠道正在保护神经元。"VeenaPrahlad教授这样说道。相关研究结果发表在学术期刊CellReports上。科学家们之前曾经发现帕金森病与线粒体缺陷之间存在关联,但是线粒体缺陷如何影响神经元一直成谜。有些学者认为...
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猿类可能也会揣测他人心思
猿类可能也会揣测他人心思据新华社华盛顿10月6日电美国《科学》杂志6日发表的一项新研究显示,猿类可能也能揣测他人心思,这意味着猿类可能比我们此前认为的更像人类。为了解猿类是否也有类似心智,美国、日本和德国研究人员制作了两个简短视频,让黑猩猩、倭黑猩猩和猩猩三种猿类观看,并用眼红外跟踪器对它们的注视焦点进行追踪。在*个视频中,人类扮演的假猩猩从背后拍打两下某人,然后在被袭击者的注视下躲到身旁两个草堆中的一个;被袭击者通过一扇门离开后,假猩猩钻出草堆逃离现场;当被袭击者拿着棍子再...
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国庆放假通知
国庆放假通知公司各部门:根据国家相关假期安排通知精神,并结合公司业务状况,现将公司“国庆”节放假调休的具体安排通知如下:一、公司本部于10月01日至07日放假公休,共7天。10月08日(星期六)正式上班。二、节后公司本部上班时间调整为(从10月08日起执行):上午:08:30—12:00,下午:13:30—18:00三、公司中层(含)以上主管,手机要24小时保持开机,以便通讯联络畅通。四、提醒假期外出探亲访友或游玩的员工:“注意出行安全,结伴而行”!恭祝大家:“国庆快乐、阖家...
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细胞技术产业转化不容易,我们要坚定信念迎接挑战
细胞技术产业转化不容易,我们要坚定信念迎接挑战美国卡特前总统宣布通过使用默沙东的KEYTRUDA药物(PD-1类药物),黑色素瘤消失,免疫治疗走入大众视野。从2015年至2016年初,国内外细胞技术发展都是如火如荼。但随着今年5月初国家细胞产业相关政策的硬着陆,中国的细胞产业经历了一轮大洗牌,一大批技术实力不过硬的公司被淘汰,而沉淀下来的具有产业实力的公司也将面临更多的挑战。2016年9月22日在深圳举办的BT峰会活动上,生物谷有幸采访到了国内细胞领域企业中源协和细胞基因工程...
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这些感冒的冷知识 你知道几个?
这些感冒的冷知识你知道几个?1.为什么低温容易得感冒?上个世纪六十年代,鼻病毒(rhinoviruses)成功地从病人样本中分离得到,并被证明能够引发人体的上呼吸道感染。此前的研究指出:该病毒的*素质温度比人体生理温度略低,大约为33-35°C。这一结果也支持了该病毒仅仅造成鼻腔而非肺部的感染(由于鼻腔的温度低于肺部)。RV的首要感染目标为呼吸道的表皮细胞,与机体的其它部位类似,呼吸道表皮细胞也拥有天然免疫信号系统,它能够感受外界的病毒感染,并通过TLR、RLR等信号感受元件...
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