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细胞常规培养传代流程
点击次数:372 发布时间:2016-11-17
 

细胞常规培养传代流程


细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)

1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加1ml  0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,建议边观察边消化)
 
 2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散

3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养

4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
 

 

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