|
|
|
|


 企业新闻 NEWS 你当前的位置:首页>> 企业新闻


直接 ELISA法
点击次数:773 发布时间:2016-11-10
 

直接 ELISA法

[直接 ELISA法] 实验步骤 1. 包被抗原1) 用 PBS 或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度 20 μg/ml。用移液器吸取 50 μl 稀释抗原到 PVC 酶标板上,按要求往后进行系列稀释。2) 酶标板上覆盖封口膜,室温孵育 2 小时,或者 4 °C 一夜。孵育时间需要优化。3) 倒掉孵育溶液,用 PBS 洗板 2 次,每孔 200 μl。在水池上轻甩倒掉洗液,在纸巾上轻拍酶标板除去残留液 [ELISA 抗原 缓冲液 抗体]

实验步骤

1. 包被抗原

1) 用 PBS 或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度 20 μg/ml。用移液器吸取 50 μl 稀释抗原到 PVC 酶标板上,按要求往后进行系列稀释。

2) 酶标板上覆盖封口膜,室温孵育 2 小时,或者 4 °C 一夜。孵育时间需要优化。

3) 倒掉孵育溶液,用 PBS 洗板 2 次,每孔 200 μl。在水池上轻甩倒掉洗液,在纸巾上轻拍酶标板除去残留液体。

2. 封闭

1) 用含 5% 脱脂奶粉或含 5% 血清的 PBS 缓冲液封闭酶标板上剩余的蛋白结合位点,每孔 200 μl。或者用其他封闭剂如 Block ACE、BSA(牛血清蛋白)代替。

2) 封口膜覆盖酶标板室温至少孵育 2 小时,或者 4 °C 一夜。

3) PBS 洗板 2 次。

3. 加抗体孵育

1) 加入抗体,每孔 100 μl,稀释到*浓度(参照厂家推荐),使用前用封闭液现配。

2) 封口膜覆盖酶标板室温孵育 2 小时,孵育时间需要进行优化。通常 2 小时孵育即可获得足够强的信号,但如果获得的信号较弱时,可4 °C 孵育一夜获得较强信号。

3) PBS 洗板 4 次

4. 检测

1) 用多通道吸液器加入底物,每孔 100 μl(或 50 μl)。

2) 显示出足够深的颜色后,加终止液(如有必要),每孔 100 μl。

 

上海康朗生物科技有限公司主营:Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,猪Elisa试剂盒,细胞,生物细胞学等科研产品
上海康朗生物科技有限公司 版权所有 总访问量:172767 地址:www.shklsw.com 邮编:201612
电话:86-021-61998208 传真: 手机:18217752821 联系人:蔡盼盼 邮箱:shklbio@163.com
GoogleSitemap 网址:www.shklsw.com 技术支持:化工仪器网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备15039594号-1
电话
021-61998208
手机
18217752821
点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息
分享到:

化工仪器网

推荐收藏该企业网站