细胞培养中污染的预防与清除一、污染的预防预防是防止细胞培养过程中发生污染的办法。只有预防工作做在前，才能将发生污染的可能性降到zui小程度。一般预防可从以下几方面着手：（一）从操作者做起1、操作者责任心要强，要细心稳重，操作技术要熟练。进无菌室前要用肥皂洗手或用5%新洁尔灭浸泡5分钟，按规定穿隔离衣。进入后关好门，坐下来尽量少走动。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。事先要严格检查器材、溶液和培养物，不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内，更不能随便使用，以...

关于ELISA试剂盒实验边缘效应问题的分析我们在使用ELISA试剂盒96孔板的实验测定的时候，常发现有“边缘效应"，也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定...

研究发现自身免疫性疾病的重要控制机制瑞典医科大学卡罗林斯卡学院的研究者发现了一种新的免疫系统的控制机制。这个发现对严重疾病的治疗具有潜在的意义，例如多发性硬化（MS），类风湿关节炎和系统性红斑狼疮。卡罗林斯卡学院医学系副教授MikaelKarlsson说“现在我们已经开始了解这些自身免疫性疾病的调节机制，我们希望能够找到新的治疗。”且这项研究后面的一个小组在享有很高声誉的期刊JournalofExperimentalMedicine上已经发表了文章。免疫缺陷的重要组成部分是一...

新发现成功逆转心脏病带来的损伤布里斯托尔大学的科学家的新发现有助于解释血管周围名为“周皮细胞”的细胞如何刺激新血管生长，激素“瘦素”扮演了怎样关键的角色。瘦素是由脂肪细胞产生的，可以通过抑制食欲帮助调节体内能量平衡，这项研究对于治疗心脏病和癌症有着重要的意义，目前，这两种疾病是*范围内的两个主要杀手。心血管的生长，又称为“血管生成”，是无论健康或疾病都存在着的重要过程，不仅参与着组织损伤后的修复，也在癌症的生长和扩散中起到重要作用。在此次研究中，科学家发现瘦素所扮演的重要角色...

ELISA测定操作是需要注意的环节临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。现分述如下：一、临床标本的收集和保存用于ELISA测定的临床标本zui为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般...

IHC(P)免疫组化石蜡切片操作规程（一）、仪器设备1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉；2）水浴锅（二）、试剂1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl137mmol/L，KCl2.7mmol/L，Na2HPO44.3mmol/L，KH2PO41.4mmol/L。2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠3g，柠檬酸0.4g。3）0.5mol/LEDTA缓冲液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA•2H2O...

生物素衍生物的标记及其产物的检测原理一、生物素简介生物素（biotin，B）分子量244．31D．生物素分子有两个环状结构，其中Ⅰ环为咪唑酮环，是与亲和素结合的主要部位；Ⅱ环为噻吩环，C2上有一戊酸侧链，其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的*结构，经化学修饰后，生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素。二、生物素衍生物简介1、常见的标记方法标记方法举例说明标记蛋白质氨基生物素羟基琥珀酰亚胺酯（BNHS）★适用于标记抗体和中性或偏碱性的蛋白质长臂活化生物素（BCNH...

冷冻干燥中的保护剂冷冻干燥简称冻干是将需要干燥的药物溶液预先冻结成固体然后在低温低压条件下从冻结状态不经过液态而直接升华除去水分的一种干燥方法由于整个操作过程都处于低温状态故这种方法尤其适用于热敏性蛋白质药物制剂的制备。而冻干后的蛋白质药物呈疏松状饼块样，不仅有利于保存而且有利于蛋白质药物重溶后的复性。显然，冻干技术为理化性质不稳定的蛋白质药物制剂提供了一种有效的制备方法然而冻干过程是一个复杂的相变过程，在冻结、冻融、干燥和储存过程中存在着多种诱导药品中蛋白质变性的因素，故常...

细胞培养污染的途径、危害及预防措施污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测，而且污染源能长期共存于培养体系中，这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体，会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应，造成培养细胞生物学特性的改变，而实验结果造成潜在的威胁，而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物理、化学及生物因素都可能入培养环境造成污染。由于入侵的微生物在培养系中不断增殖、代谢，因此生物性的污染对细胞的害zui大。随着污染微生物的不断增殖...

康朗常用细胞系物种、名称、类型、来源、核型及培养液常用细胞系所用培养液参考，其它详细参见ATCC细胞库(www.atcc。。ｏｒｇ)细胞系名称细胞类型物种来源组织培养液与血清293成纤维细胞人胚胎肾MEM,10%马血清3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%FBSA549上皮样人肺癌F-12K,10%FBSA9成纤维细胞小鼠结缔组织DMEM,10%FBSAtT-20上皮样小鼠垂体肿瘤F-10,15%马血清+2.5%FBSBALB/3T3成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%FBS...

贴壁细胞传代流程一、zui初接触：1、离心速度太大，时间过长，对细胞的损伤越大。2、巨噬细胞喜欢组团生长，然而各个细胞团之间必须留足够大的空隙，所以巨噬细胞养的细胞量低一点比较合适。3、胰酶对细胞而言是一个损伤，必须减少与细胞接触时间，前人经验是细胞变圆，有少量漂浮时可以拍打培养基。4、中和胰酶的方法，可以用血清，也可以用培养基，如果是用培养基，用了控制在2倍左右，血清控制在25%左右。二、流程图：

常用细胞系物种、名称、类型、来源、核型及培养液细胞系名称细胞类型物种来源组织培养液与血清293成纤维细胞人胚胎肾MEM,10%马血清3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%FBSA549上皮样人肺癌F-12K,10%FBSA9成纤维细胞小鼠结缔组织DMEM,10%FBSAtT-20上皮样小鼠垂体肿瘤F-10,15%马血清+2.5%FBSBALB/3T3成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%FBSBHK-21成纤维细胞仓鼠肾DMEM,10%FBSorMEM,10%FBSandNEA...