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柱式病毒RNAOUT使用手册
点击次数:577 发布时间:2017-10-16
 

柱式病毒RNAOUT

Column Vrial RNAOUT

产品及特点

本产品在天泽基因一管式病毒RNAOUT的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品,它具有下列特点:

  • 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
  • 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的zui终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
  • 安全无毒,不需要使用苯酚和氯等有机溶液。
  • 如果加上病毒离心富集步骤,zui多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
  • RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
  • 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
  • 适用于各种材料,包括血清血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

规格及成分

   成份

编号

大纸盒包装

柱式病毒RNAout溶液A

71001A

30 mL

离心吸附柱(小提)

60911

50套

通用洗柱液

60408

50 mL

RNA洗脱液

71207

10 mL

使用手册

1份

 

运输及保存

常温运输,4保存,有效期一年。

自备试剂

使用方法

  • 在1.5 mL离心管中加入0.1-0.2 mL液体病毒样品。如果病毒需要富集可以将1.5 mL液体在4℃下24000 g冷冻离心60分钟移弃1.3 mL后继续操作。
  • 加入0.6 mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
  • 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
  • 12,000-15000 g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液
  • 加入0.8 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000-15000 g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
  • 12,000-15000 g室温离心分钟
  • 在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100 uL通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5 mL离心管中室温放置2分钟。
  • 12,000-15000 g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
  • RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可-80℃长期保存。

相关资料

常见人类疾病相关RNA病毒

病毒

简称

疾病名称

类型

长度(Kb)

Measles virus

MV

measles

ssRNA

4.5~85

Hepatitis A Virus

HAV

hepatitis type A

ssRNA

7.5

Poliomyelitis virus

PV

polio

ssRNA

7.8

Rubella virus

RV

German measles

ssRNA

7.9

Hepatitis C Virus

HCV

hepatitis type C

ssRNA

9.3~9.4

Human immunodeficiency virus

HIV

AIDS

ssRNA

9.7

Dengue Virus

DV

dengue

ssRNA

11

Yellow fever virus

YFV

yellow fever .

ssRNA

11

Rabies virus

RV

rabies

ssRNA

11.9

Influenza A virus

IAV

influenza

ssRNA

13.5

Mumps virus

MuV

mumps

ssRNA

15.4

Ebola virus

EBV

virus hemorrhagic fever

ssRNA

19

 

疑难解答

Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?

A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒zui多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的量往往比一个细胞中核酸的量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。

关联产品

柱式病毒DNAOUT(CAT#:70701-50)

 

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