ELISA规范品溶解与稀释的正确过程 ELISA规范品溶解与稀释的正确过程: 1. 粉末规范品时间短离心,让因运送沾到管盖、管壁的规范品沉到管底。 2. 依据瓶标签参加必定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震动,室温静置溶解 10-30min,让粉末*溶解。 留意:加水后暂不必移液枪吹吸,防止蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或涡旋振动混匀。 3. 规范品梯度稀释: (1)耗材预备:预备8个1.5Ml离心管,写上S1-S7、空白。 (2)规范品稀释液的挑选: 若血清、血浆、安排匀浆样本,用试剂盒中的规范品稀释液,梯度稀释规范品。 若细胞上清样本,主张用细胞培养基梯度稀释规范品。 (3)梯度稀释:依据说明书,每管参加等体积的规范品稀释液(培养基)。汲取同体积溶解好的规范品到S1管中,吹打10次混匀,涡旋5S。从S1管中汲取同体积溶液到 S2管,吹打10次混匀,涡旋5s。同法稀释S3-S7浓度。 (4)空白: 规范品稀释液(培养基)作为空白即零浓度。 留意:梯度稀释规范品时,涡旋震动混匀后可时间短离心,让到盖子、壁上的液体到管底,再开始稀释下个浓度。 规范品溶解、梯度稀释是ELISA试验要害点,按以上办法梯度稀释就可! |