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一站式植物mRNAOUT

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一站式植物mRNAOUT构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。
  一站式植物mRNAOUT的详细资料:
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一站式植物mRNAOUTOne-Stop Plant mRNA Isolation Kit25次常温运输,4℃保存,Oligo(dT)纤维素低温运输,-20℃保存,有效期一年。

一站式植物mRNAOUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。本产品专门用于从植物组织中一站式提取mRNA,其操作如下:
具有下列特点:
1. 一站式,是由天恩泽的高效、无多糖柱式植物RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成,即开即用,非常方便。
2. 一次可以处理50-500 mg的植物组织,能得到约10-15 μ g总RNA,从中可得0.1-0.5 μg左右的mRNA。
3. Oligo(dT)纤维素吸附能力强,每克可以吸附50-80 OD的mRNA,相当于2000-3000 μg mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单,只需要离心就可以完成,免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
1. 用植物RNAOUT的方法提取植物总RNA,zui后用50 μ L洗脱,将两管收集在一起,共得到100 μ L总RNA(详见柱式植物RNAOUT的使用手册)。
2. 从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100 μ L加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A,混匀后4℃ 200 g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次。用RNase-free水洗脱mRNA。
3. 用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测。

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