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一站式真菌mRNAOUT | One-Stop Fungal mRNA Isolation Kit | 25次 | 常温运输,4℃保存,Oligo(dT)纤维素低温运输,-20℃保存,有效期一年。 |
一站式真菌mRNAOUT产品及特点
本产品专门用于从常见的各种真菌中快速提取总RNA,然后再用(dT)纤维素分离其中的mRNA,提取过的真菌包括Candida albican、Saccharomyces cerevisiae,Schizosaccharomyces pombe 和Pichia pastoris、Aspergillus flavu 等。其操作流程如下:
的特点是:
1. 一站式操作,本试剂盒足够50次微量真菌总RNA提取,25次从总RNA开始的微量mRNA提取。
2. 得到的m R N A 可直接用于R T - P C R 、N o r t h e r n 杂交、m i c r o a r r a yhybridization、cDNA合成等。
3. 操作比柱式法mRNA纯化法更简单,不需要过柱,免去很多繁琐步骤。
4. 整个过程只需要约60分钟。
使用及效果
1. 用真菌RNAOUT的方法提取真菌总RNA,将两管收集在一起,共得到100 μL总RNA(详见真菌RNAOUT的使用手册)。
2. 从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100 μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A,混匀后4℃ 200g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次,用DEPC水洗脱并收集mRNA。
3. 用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测