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一站式动物mRNAOUT

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一站式动物mRNAOUT构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。本产品专门用于从动物组织中提取mRNA。
  一站式动物mRNAOUT的详细资料:
中文名称英文名称规格保存条件
一站式动物mRNAOUTOne-Stop Animal mRNA Isolation Kit25次常温运输,4℃保存,有效期一年

一站式动物mRNAOUT产品及特点
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。本产品专门用于从动物组织中提取mRNA,其操作步骤如下:
具有下列特点:
1. 一站式,由柱式动物RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成,即开即用,非常方便。
2. 一次可以处理50-100 mg的动物组织,能得到约10-15 μ g总RNA,从中可得0.1-0.5 μ g左右mRNA。
3. Oligo(dT)纤维素吸附能力强,每克可以吸附50-80 OD的mRNA,相当于2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取过程操作简单,只需要离心就可以完成,免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作。
5. 得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果
1. 用柱式动物RNAOUT的方法提取动物总RNA,zui后用50μL洗脱,将两管收集在一起,共得到100μL总RNA(详见柱式动物RNAOUT的使用手册)。
2. 从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A混
匀后4℃ 200 g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次。用DEPC水洗脱并收集mRNA。
3. 用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测。

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