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细胞培养常见污染识别及处理
点击次数:1325 发布时间:2017-06-06

细胞培养常见污染识别及处理

参考格式:
1.内容(含图片)来源:原创、非原创(请说明具体来源)
2.细胞基本信息:名称、种属来源、冻存液、传代数、传代方法、培养基等。
3.图片:如污染前图片、处理后图片
4.污染识别(含试剂盒检测)、污染 处理的过程。
5.心得体会。 也欢迎各位战友积极讨论、发表自己独到的见解。
小黑点:不随细胞生长而繁殖,可能是磷酸钙沉淀,反之,可能是黑焦虫,镜下会动,会影响细胞生长或重组细胞蛋白表达。
贴壁的黑色碎片可能是细胞裂解碎片。
霉菌污染:贴壁培养有丝状白色,严重的的霉斑,絮状,如果在发酵罐,白色的小球,像碾碎的泡沫塑料。
大肠细胞絮状结团漂浮,培养液浑浊
链球菌:圆形,亮点,三三两两连接
细胞中如果污染细菌,zui常见的有革兰阳性菌,如枯草杆菌。以及大肠杆菌、假单孢菌等革兰阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。培养细胞受细菌污染后,会很快出现培养液变混浊,pH改变。
也有少数培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染。所以,每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,zui后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株(系)丢失。
判断污染的方法:如果是细菌污染,应该很快培基就浑浊了。如果是真菌感染,特别是初期感染,在低倍镜下可以看到小黑点,特别是成团的小黑点,要特别注意。如果无法确定,就换高倍镜,如果是死细胞,高倍镜下就可以分辨,而真菌高倍镜下仍然是小黑点。有些(比如支原体)污染,镜检是看不到的,但是细胞的生长异常。
 


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