细胞常规培养传代流程

细胞常规培养传代流程

细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加1ml  0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间，建议边观察边消化）
 
 2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散

3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养

4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存