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大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒

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大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒用于大鼠血清,血浆及相关液体样本中封闭蛋白5(CLDN5)含量。价格实惠,现货供应.
  大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒的详细资料:

大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒的对照说明

1.封闭时间改用37度2h,是4度24h

2.洗板改成5次以上

以上为了保证减少非特异性吸附造成的显色,影响对结果的判断和分析。

结果显示:1:10、1:100、1:200、1:400的阴、阳血清均随抗原呈现剃度变化。

阳性血清呈梯度变化是可以理解的,但阴性血清不该这么明显,原因有二:a.包被抗原量不足,大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒封闭不够充分,导致板条仍有未封闭的位点,可以和酶标抗体结合,自然包被抗原量越多,位点越少,则显色越弱。b.阴性血清稀释度过低,导致仍存在非特异的结合,在封闭完全的情况下,要保证阴性血清OD值低,根据具体情况可以稀释到1000倍或以上都可以。

抗原空白对照背景低,但一抗空白对照背景高,甚至比阴性血清OD值高。

这点用封闭不完全比较好解释,阴性血清在这里相当于起了一个封闭作用,酶标抗体结合少了,显色自然低了。

大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒另外1:10稀释的阴性血清和阳性血清OD值相差较大,这与报道较多的1:100稀释效果好有些出入,不知是否可以用于以后检测时的稀释倍数??以上原因是否与包被抗原未进行较高提纯以及封闭有关?

OD值相差较大,但首先要看阴性对照的本底如何(较空白空如何)?如果本底高,是会对结果造成影响的。这里需要找出稀释度。

大鼠封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒抗原的提纯是取决于抗体特异性的,如果所使用的为单抗,对抗原纯度要求可以不高,但是如果是多抗,那么抗原不纯将容易引起非特异性的显色。

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