ELISA试剂盒特别的包被方式
ELISA试剂盒这以后经过抗原抗体反响使抗原固相化。此直接在固相上的抗原远离载体外表，其抗原决定簇也得以充分露出。直接包被的抗原经固相抗体的亲和层析效果，人elisa试剂盒包被在固相上的抗原纯度大大提高，因而含杂质较多的抗原也可采用捕获包被法,实验的特异性、敏感性均由此得以改进，重复性亦佳。直接包被 的另一长处是抗原用量少，仅为直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯载体上的非蛋白质抗原可采用。例如，在检查抗DNA抗体时，需用 DNA作为包被抗原，而遍及的固相载体通常不能直接与核酸。
办法二 用于检查不知道抗体的直接法： 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml， 每孔加0.1ml，4℃一夜。次日洗刷3次。
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ELISA试剂盒加必定稀释的待检样品（不知道抗体）0.1ml于上述已包被的反响孔
中,置37℃孵育1小时,洗刷。（一起做空白、阴性及阳性孔对照）
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于反响孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，
37℃孵育30-60分钟，洗刷,zui终一遍用DDW洗刷。
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其他步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。
ELISA试剂盒将抗原或抗体固定在进程称为包被。换言之，包被便是抗原或抗体到固相载体外表的进程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是经过物理吸附的，靠的是蛋白质分子 构造上的疏水基团与固相载体外表的疏水基团间的效果。这种物理吸附对错特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、人ELISA试剂盒浓度等的影响。载体对不一样 蛋白质的吸附才能是不相同的，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常富含更多的疏水基团，因而更易吸附到固相载体外表。IgG对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附 力，其联合多发生在Fc段上，抗体点露出于外，因而抗体的包被通常均采用直接吸附法。 |
