一种新型的实时细胞分析系统来检测病毒导致的细胞病变以及中和抗体对2009年的H1N1病毒的效力 RTCA系统是由四个部件组成:一个电子传感器、一个机械装置、E-plate、一个软件控制单元。机械装置放在组织培养箱中,能够利用电子传感器检测E-plate上每个孔的电阻。在控制软件的控制之下,CI是基于电子的阻抗,是细胞生长状况的代表。为了检测实时分析细胞的扩增情况。
为了获得背景值,我们首先添加50ul的细胞培养基到96孔E-plate的每一个孔中,然后将每100ul培养基含有2倍浓度的MDCK细胞(稀释梯度从4.0X104到2.5X103)接种到E-plate。将包含细胞的96孔E-PLATE放到室温孵育30min,然后放到位于培养箱中的RTCA SP/MP装置中,细胞值每15min自动检测一次。为了检测*的TPCK-trypsin浓度,我们做了一个将细胞放在含有TPCK-trypsinDMEM培养基中培养的实验,当细胞达到预期时,将 E-plate从RTCA系统中拿出,用DMEM培养基冲洗两次。然后添加150ul的包含有TPCK-trypsin的MEM培养基(终浓度为10–0.31 mg/mL)。将E-PLATE立刻放到装置中,继续检测CI值 |