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TNF-α试剂盒该如何储存?

更新时间:2025-11-25点击次数:43
  TNF-α试剂盒通常基于酶联免疫吸附测定(ELISA)技术。这是一种通过抗体与抗原特异性结合来进行定量分析的方法。具体步骤如下:
 
  1.包被抗体的固定:将特异性抗TNF-α抗体固定在微孔板的表面上。这些抗体能够准确识别并结合TNF-α分子。
 
  2.样本加入:接着,把待测样本添加到微孔中。如果样本中含有TNF-α,它就会与固定的抗体发生结合反应。
 
  3.检测抗体结合:随后加入另一种带有酶标记的抗体。这种带有酶标的抗体同样能与TNF-α结合,形成“夹心”结构,即一边是先前固定的抗体,另一边是新加入的酶标抗体。此时,酶的活性尚未发挥出来。
 
  4.颜色变化与浓度相关:加入特定的底物溶液后,酶会催化底物产生颜色变化。颜色的深浅与样本中TNF-α的浓度成正比。通过测量颜色的强度,并参照预先制定的标准曲线,就可以推算出样本中TNF-α的具体浓度。
 
  TNF-α试剂盒的使用注意事项:
 
  -避免交叉污染:不同浓度的标准品和样本应使用专用移液器,勿混用枪头;加样时注意更换枪头以防交叉污染。
 
  -准确计时与控温:严格遵循说明书中的温育时间和温度要求,避免因环境差异导致实验偏差。
 
  -溶血干扰排除:血液样本离心时需确保分离红细胞,否则血红蛋白可能影响光学检测结果。
 
  -组织匀浆优化:对于固体组织来源的样本,建议采用匀浆仪充分破碎细胞,并通过高速离心去除碎片以提高上清液纯度。
 
  -有效期核查:使用前确认试剂盒及内部组分的有效期限,过期产品可能导致灵敏度下降或假阳性/假阴性结果。
 
  -储存条件合规:未启用的试剂应按照标签指示低温保存,已复溶的标准品需尽快用完以避免降解。
 
  -标准曲线拟合:推荐使用专业软件对标准品OD值进行非线性回归分析,而非简单线性拟合,以提高定量准确性。
 
  -异常值复核:若某样本吸光度过高或过低超出量程范围,需重新稀释后复测,避免外推法带来的误差放大效应。
 
  -个人防护装备佩戴:实验过程中穿戴实验服、手套和护目镜,尤其涉及潜在感染性生物样本时。
 
  -废弃物规范处置:含酶抑制剂或其他有毒成分的反应废液应按实验室生物安全规定统一收集处理。

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