|
|
|
|


 技术文章 ARTICLE 你当前的位置:首页>> 技术文章


细胞学堂 | 293细胞系家族谱系大揭秘
点击次数:350 更新时间:2023-07-04

HEK293细胞的起源


HEK293细胞的历史可以追溯到1973年,当时荷兰莱顿大学的Alex Van Der Eb博士和Frank Graham博士在研究人类腺病毒(Adenovirus)时培养了这种细胞,细胞命名中的数字可以追溯到他的第293次实验产生的原始细胞克隆这一事实。通过腺病毒5(Ad5 DNA)进行了转染,由于存在Ad5 E1A/B基因,使其细胞周期以及细胞表型、核型等发生了改变,获得永生化特性,在生产腺病毒载体和腺相关病毒载体、生产蛋白、疫苗、抗癌试剂以及细胞生物学研究上广泛应用。




HEK293细胞系的特点和用途


目前为止,HEK293细胞有多种衍生细胞系,每种细胞系的特点不尽相同,用途也存在着差异。今天小普给大家介绍下有关293T、293F、293H和293S四大分支细胞的特点及用途。


                                                             HEK293细胞系及其衍生/历史的示意图




HEK293T


它是HEK293细胞系的亚克隆,经过修饰表达SV40 T抗原,其表达的SV40T抗原可以实现外源表达载体的扩增,最终增加目的基因表达,常用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。




HEK293H


来自表达E1A腺病毒基因的HEK293细胞,粘附性较强,常用于噬菌斑检测实验和重组蛋白的表达和生产。在293H细胞中插入EBNA-1基因可得到293E,该基因含有EBV复制起点(oriP)的重组表达载体,能够在H293E细胞中复制,显著提高蛋白的表达;293-6E细胞是在293-H细胞表达截断的EBNA1,其能够在无血清培养体系中进行蛋白表达及病毒载体的生产。




HEK293F


由HEK293细胞系衍生的一个可以在无血清培养基中快速增长的细胞系,可以高效表达蛋白。由293F细胞导入pCMVSPORT6TAg.Neo质粒可获得293FT,可以用于生产慢病毒载体和基因编辑等领域。293FTM细胞是由Flp-InTM T-RExTM 293细胞导入单嗜性(ecotropic)报告质粒和MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap) 报告质粒获得,常用于蛋白互作筛选。




HEK293S


用逐渐适应性培养的方法,将细胞驯化成能够悬浮培养且耐受低Ca2+培养的细胞系,即293S细胞。293S细胞用甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰,再转染pcDNA6/TR质粒,得到293SG细胞,常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。此外,该细胞系中具有四环素表达抑制基因,也可用于四环素诱导的蛋白表达研究。;用pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒对293SG细胞进行转化,得到293SGGD细胞,用于糖基化工程研究中。




HEK293细胞的应用


HEK293细胞在一些研究领域中的应用非常广泛,概述如下:

受体信号

HEK293可用于离子通道和细胞膜受体的异源表达,通常用来研究与疾病相关的G蛋白偶联受体信号通路。

癌症研究

HEK293细胞具有致瘤性,常用于癌症研究。适用于测试分析癌症治疗效果。

蛋白质生产

HEK293细胞可大量产生重组蛋白,可用于开发生产疫苗和生物治疗性蛋白。

基因表达实验

HEK293细胞常用于转染,检测表达基因或蛋白,更好的研究基因表达和功能,蛋白质功能以及基因突变等。




参考文献

1. Hu J, Han J, Li H, et al. Human Embryonic Kidney 293 Cells: A Vehicle for Biopharmaceutical Manufacturing, Structural Biology, and Electrophysiology. Cells Tissues Organs. 2018;205(1):1-8. doi:10.1159/000485501

2. Stepanenko AA, Dmitrenko VV. HEK293 in cell biology and cancer research: phenotype, karyotype, tumorigenicity, and stress-induced genome-phenotype evolution. Gene. 2015;569(2):182-190. doi:10.1016/j.gene.2015.05.065

3. Lin YC, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nat Commun. 2014;5:4767. Published 2014 Sep 3. doi:10.1038/ncomms5767




上海康朗生物科技有限公司主营:Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,猪Elisa试剂盒,细胞,生物细胞学等科研产品
上海康朗生物科技有限公司 版权所有 总访问量:332540 地址:www.shklsw.com 邮编:201612
电话:86-021-61998208 传真: 手机:18217752821 联系人:蔡盼盼 邮箱:shklbio@163.com
GoogleSitemap 网址:www.shklsw.com 技术支持:化工仪器网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备15039594号-1
电话
021-61998208
手机
18217752821
点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息 点击这里给我发消息
分享到:

化工仪器网

推荐收藏该企业网站