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懂了这些ELISA技能点你就入门了
点击次数:551 发布时间:2017-03-30

懂了这些ELISA技能点你就入门了
 ELISA试剂盒为了得到非常好的实验效果,一些实验菜鸟们还需多加了解技术内容,公司每周都会为您精心收拾出关键技术办法,可以熟练的掌握好这些往后再应用到实验里边就会简略的多。今日的主要内容ELISA试剂盒的一些技术关键:
样本加样办法
1、细胞上清:前处理有必要是细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
2、脑脊液:前处理有必要是细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
3、血清血浆:请参与50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量参与,缺少部分用标准品稀释液赔偿至100ul。
4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中参与蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,构成查看效果的值偏低。
ELISA试剂盒因组织匀浆液的样本蛋白品种多,含量丰厚,实验参照血清血浆标本的处理办法进行,否则就会影响实验效果。具体是参与50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量参与,缺少部分用标准品稀释液赔偿至100ul。
A.血清标本应是天然凝聚后,取上清,防止在冰箱中凝聚血液;
B.血浆标本,推荐用EDTA的办法收集若待测样本不能及时查看,标本收集后请分装,冻存于-20℃,防止重复冻融。
C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
D.标本应明澈通明,查看前样本中如有悬浮物应通过离心去掉。
E.请勿运用溶血,高血脂或污染的标本查看,否则效果将不。
ELISA试剂盒因为政策蛋白不一样,或许构成降解的蛋白类型或许不一样,假定实验前通过文献断定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性参与,可节省抑制剂。假定查不到有关文献,可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。

 


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